Amidase (AMD)
Enzymer:Er makromolekylære biologiske katalysatorer, de fleste enzymer er proteiner
Amidase:Katalyserer hydrolysen af forskellige endogene og fremmede alifatiske og aromatiske amider ved at overføre en acylgruppe til vand med produktion af frie syrer og ammoniak. Hydroxamsyrer og andre organiske syrer anvendes i vid udstrækning som lægemidler, fordi de er bestanddele af vækstfaktorer, antibiotika og tumorhæmmere. Amidaserne kan opdeles i R-type og S-type acylaser i henhold til katalysatorens stereoselektivitet.
Ud over at katalysere hydrolysen af amider kan amidase også katalysere acyloverføringsreaktioner i nærvær af co-substrater såsom hydroxylamin.
Amidaser med forskellige kilder har forskellig substratspecificitet, nogle af dem kan kun hydrolysere aromatiske amider, nogle af dem kan kun hydrolysere alifatiske amider, og nogle hydrolyserer α- eller ω-aminoamider. De fleste aminer har kun god katalytisk aktivitet for acykliske eller simple aromatiske amider, men for komplekse aromater er heterocykliske amider, især amider med ortho-substituenter, generelt lavt aktive (kun få enzymer udviser bedre katalytiske effekter).
Katalytisk mekanisme:
| Enzymer | Produktkode | Produktkode |
| Enzympulver | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | et sæt med 19 amidaser, 50 mg hver 19 stk. * 50 mg / stk. eller anden mængde |
| Screeningsæt (SynKit) | ES-AMD-1900 | et sæt med 19 amidaser, 1 mg hver 19 stk. * 1 mg / stk. |
★ Høj substratspecificitet.
★ Stærk kiral selektivitet.
★ Høj konverteringseffektivitet.
★ Færre biprodukter.
★ Milde reaktionsbetingelser.
★ Miljøvenlig.
➢ Enzymscreening bør udføres for specifikke substrater på grund af substratspecificiteten og finde et enzym, der katalyserer målsubstratet med den bedste katalytiske effekt.
➢ Må aldrig komme i kontakt med ekstreme forhold såsom: høj temperatur, høj/lav pH og organisk opløsningsmiddel med høj koncentration.
➢ Normalt bør reaktionssystemet omfatte substrat, bufferopløsning (enzymets optimale reaktions-pH). Cosubstrater såsom hydroxylamin bør være til stede i acyltransferreaktionssystemet.
➢ AMD bør tilsættes sidst i reaktionssystemet med optimal reaktions-pH og -temperatur.
➢ Alle typer AMD har forskellige optimale reaktionsbetingelser, så hver af dem bør undersøges yderligere individuelt.
Eksempel 1(1):
Hydrolyseaktivitet til forskellige amidsubstrater
| Substrat | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 | Substrat | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 |
| Acetamid | 3,8 | ο-OH benzamid | 1.4 |
| Propionamid | 3,9 | p-OH benzamid | 1.2 |
| Laktamid | 12,8 | ο-NH2benzamid | 1.0 |
| Butyramid | 11.9 | p-NH2benzamid | 0,8 |
| Isobutyramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0,3 |
| Pentanamid | 22,0 | p-Toluamid | 8.1 |
| Hexanamid | 6.4 | Nikotinamid | 1.7 |
| Cyclohexanamid | 19,5 | Isonicotinamid | 1.8 |
| Akrylamid | 10.2 | Picolinamid | 2.1 |
| Metacrylamid | 3,5 | 3-phenylpropionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| Benzamid | 6,8 |
Reaktionen blev udført i 50 mM natriumphosphatbufferopløsning, pH 7,5, ved 70 ℃.
| Amider | Hydroxylamin | Hydrazin |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramid | 25,0 | 22,7 |
| Benzamid | 9.2 | 6.1 |
Reaktionen blev udført i 50 mM natriumphosphatbufferopløsning, pH 7,5, ved 70 ℃.
Relateret reagenskoncentration: amider, 100 mM (benzamid, 10 mM); hydroxylamin og hydrazin, 400 mM; enzym 0,9 μM.
Eksempel 2(2):
Eksempel 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR m.fl. Procesbiokemi, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM m.fl. Bioorganisk kemi, 2017, Tilgængelig online 7.
