Amidase (AMD)
Enzymer:Er makromolekylære biologiske katalysatorer, de fleste enzymer er proteiner
Amidase:Katalysér hydrolysen af forskellige endogene og fremmede alifatiske og aromatiske amider ved at overføre en acylgruppe til vand med produktion af frie syrer og ammoniak.Hydroxamsyrer og andre organiske syrer bruges i vid udstrækning som lægemidler, fordi de er bestanddele af vækstfaktorer, antibiotika og tumorhæmmere.Amidaserne kan opdeles i R-type og S-type acylaser i overensstemmelse med katalysatorens stereoselektivitet.
Ud over at katalysere hydrolysen af amider kan amidase også katalysere acyloverførselsreaktioner i nærvær af co-substrater såsom hydroxylamin.
Amidase med forskellige kilder har forskellig substratspecificitet, nogle af dem kan kun hydrolysere aromatiske amider, nogle af dem kan kun hydrolysere alifatiske amider, og nogle hydrolysere a- eller ω-aminoamider.De fleste af aminerne har kun god katalytisk aktivitet for acykliske eller simple aromatiske amider, men for komplekse aromater er heterocykliske amider, især amider med ortho-substituenter, generelt lave i aktivitet (kun få enzymer udviser bedre katalytiske virkninger).
Katalytisk mekanisme:
| Enzymer | Produktkode | Produktkode |
| Enzym pulver | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | et sæt med 19 amidaser, 50 mg hver 19 genstande * 50 mg / emne, eller anden mængde |
| Screeningsæt (SynKit) | ES-AMD-1900 | et sæt med 19 amidaser, 1 mg hver 19 genstande * 1 mg / stk |
★ Høj substratspecificitet.
★ Stærk chiral selektivitet.
★ Høj konverteringseffektivitet.
★ Færre biprodukter.
★ Milde reaktionsforhold.
★ Miljøvenlig.
➢ Enzymscreening bør udføres for specifikke substrater på grund af substratspecificiteten, og få et enzym, der katalyserer målsubstratet med den bedste katalytiske effekt.
➢ Kontakt aldrig ekstreme forhold som: høj temperatur, høj/lav pH og organisk opløsningsmiddel med høj koncentration.
➢ Normalt bør reaktionssystemet omfatte substrat, bufferopløsning (enzymets optimale reaktions-pH).Co-substrater såsom hydroxylamin bør være tilstede i acyloverførselsreaktionssystem.
➢ AMD skal tilsættes sidst i reaktionssystemet med optimal reaktions-pH og temperatur.
➢ Alle former for AMD har forskellige optimale reaktionsbetingelser, så hver af dem bør studeres yderligere individuelt.
Eksempel 1(1):
Hydrolyseaktivitet til forskellige amidsubstrater
| Underlag | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 | Underlag | Specifik aktivitet μmol min-1mg-1 |
| Acetamid | 3.8 | ο-OH-benzamid | 1.4 |
| Propionamid | 3.9 | p-OH-benzamid | 1.2 |
| Lactamid | 12.8 | ο-NH2benzamid | 1.0 |
| Butyramid | 11.9 | p-NH2benzamid | 0,8 |
| Isobutyramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0,3 |
| Pentanamid | 22,0 | p-Toluamid | 8.1 |
| Hexanamid | 6.4 | Nikotinamid | 1.7 |
| Cyclohexanamid | 19.5 | Isonicotinamid | 1.8 |
| Akrylamid | 10.2 | Picolinamid | 2.1 |
| Metacrylamid | 3.5 | 3-Phenylpropionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| Benzamid | 6.8 |
Reaktionen blev udført i 50 mM natriumphosphatbufferopløsning, pH 7,5, ved 70 ℃.
| Amider | Hydroxylamin | Hydrazin |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramid | 25,0 | 22.7 |
| Benzamid | 9.2 | 6.1 |
Reaktionen blev udført i 50 mM natriumphosphatbufferopløsning, pH 7,5, ved 70 ℃.
Relateret reagenskoncentration: amider, 100 mM (benzamid, 10 mM);hydroxylamin og hydrazin, 400 mM;enzym 0,9 μM.
Eksempel 2(2):
Eksempel 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Bioorganisk kemi, 2017, tilgængelig online 7.
